技術(shù)要點(diǎn)
(一)
白蠟品種選擇選用果形大,單果種子多,籽粒飽滿,種仁
白蠟品質(zhì)優(yōu)良,適應(yīng)性較強(qiáng)的優(yōu)良品系,或單株坐果力強(qiáng)、經(jīng)濟(jì)效益優(yōu)的多果型豐產(chǎn)品系。
(二)外植體材料的預(yù)處理及選擇
1.外植體材料的預(yù)處理:栝樓品種塊莖(帶芽眼)于取材前
2個(gè)月埋人試驗(yàn)地塑料大棚內(nèi),待抽出匍匐莖后于取材3天前用1000倍的70%甲基托布津可濕性粉劑水溶液噴1次。剪取栝樓匍匐莖5~7厘米的莖頂,用2%洗衣粉洗去灰塵后在流水下沖洗20分鐘,再用20%的84消毒液浸10分鐘,無菌水沖洗3~4次。
2.無菌材料的獲取:經(jīng)預(yù)處理的材料在超凈工作臺上先用0.1%的升汞消毒10分鐘,無菌水沖洗3~4次,再用無菌紙吸干水分,在超凈臺上剝?nèi)?.3~0.5毫米的莖尖,白蠟作為外植體進(jìn)行組織白蠟培養(yǎng)。
(三)
白蠟培養(yǎng)基及
白蠟培養(yǎng)條件
1.
白蠟培養(yǎng)基:
誘導(dǎo)
白蠟培養(yǎng)基MS+6-BA1.5毫克/升+IBA0.3毫克/升NAA0.05毫克/升+20克/升蔗糖。增殖
白蠟培養(yǎng)基MS+6一BA1.0毫克/升十IBAO.3毫克/升AA0.05毫克/升+20克/升蔗糖。
生根白蠟培養(yǎng)基1/2MS+IBA0.5毫克/升+20克/升蔗糖各類白蠟培養(yǎng)基均按上述各種成分的量加入后,定容到1000毫升,將pH調(diào)到5.8,然后分裝到玻璃瓶內(nèi),進(jìn)行高溫高壓消毒。在21℃下20分鐘后,滅菌完畢,取出備用。
2.
白蠟培養(yǎng)條件:
白蠟培養(yǎng)溫度白天為25±2℃,夜間溫度15±2℃,光照每天10~12小時(shí),光照強(qiáng)度為2000~3500勒克斯。莖尖生長點(diǎn)在無菌室內(nèi)接種到誘導(dǎo)
白蠟培養(yǎng)基上后,移人組織
白蠟培養(yǎng)室進(jìn)行
白蠟培養(yǎng),,繼而出現(xiàn)分化出的芽叢。45天后將誘導(dǎo)出的栝樓芽叢轉(zhuǎn)接到增殖
白蠟培養(yǎng)基上進(jìn)行增殖
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